上海研域生物分析細胞株培養技術(shù)重點(diǎn)

細胞株是用單細胞分離培養或通過(guò)篩選的方法，由單細胞增殖形成的細胞群。細胞株的特殊性質(zhì)或標志必須在整個(gè)培養期間始終存在。國內資深的細胞株是通過(guò)選擇法或克隆形成法從原代培養物或細胞系中獲得的具有特殊性質(zhì)或標志的培養細胞。

下面上海研域生物技術(shù)員就為您分享細胞株培養技術(shù)的幾大要點(diǎn)，趕緊拿起小本本記好了！

一、取材

細胞株培養的材料主要來(lái)源于外科手術(shù)或活檢瘤組織，取材時(shí)避免用壞死組織，要挑選瘤細胞集中和活力較好的部位，瘤性轉移淋巴結或胸腹水是較好的培養材料。取材后盡快培養，因故不能立即培養者，可凍存。細胞株的培養方法及凍存方法同前述正常組織。

二、成纖維細胞排除

在細胞株培養中?；祀s有一些成纖維細胞，培養時(shí)能與瘤細胞同時(shí)生長(cháng)，并常壓過(guò)癌細胞，導致癌細胞生長(cháng)受阻以至消失，應仔細排除。排除方法常有：機械刮除法、反復貼壁法、消化排除法、膠原酶消化法等。

三、提高細胞培養存活率和生長(cháng)率

根據實(shí)驗經(jīng)驗，細胞株要經(jīng)過(guò)對新環(huán)境的適應才能生長(cháng)，因此不能局限于一般培養法，須采用一些特殊措施。如：用適宜底物，鼠尾膠原底層及飼細胞底層等。用細胞生長(cháng)因子，根據細胞種類(lèi)不同選用不同的促細胞生長(cháng)因子，如胰島素，雌激素等。也可以考慮動(dòng)物媒介培養。

總之，在細胞株待轉化細胞數量明顯上升，并出現細胞團塊后，可轉入細胞培養瓶中，加培養基，常溫培養半個(gè)月，一般每隔一周觀(guān)察一次，決定是否換液、傳代，靠譜的細胞株的每個(gè)步驟都至關(guān)重要。細胞生長(cháng)達一定數量后凍存，凍存前應進(jìn)行核型分析和存檔。

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